我們在做實驗時，常會遇到elisa試劑盒顯色淡靈敏度偏低的問題，以下是根據不同問題可能原因及解決方法，僅供參考。
1、孵育反應時間不足
定鬧鐘準確定時；
2、洗滌時沖擊力太大，洗滌液浸泡時間太長，洗滌次數增加
減少洗滌沖擊力，按說明書要求保留洗滌時間，準確記住洗滌次數；
3、顯色劑滴加量不足或順序顛倒
混合后滴加顯色液時，滴瓶垂直向下，持力均勻，滴速不宜過快，先加顯色劑 A，反加顯色劑B，不可將A、B液混合后加入；
4、顯色劑反應時間不足
定鬧鐘準確定時；
5、蒸餾水水質有問題
測定蒸餾水配制試劑對酶免疫法的影響；
6、elisa試劑盒在運輸途中時間太長，溫度太高
試劑盒置保溫箱內運輸，并放足夠數量的冰塊，盡量縮短運輸時間；
7、試劑、樣品用前未能平衡
用前試劑、樣品置室溫平衡 30分鐘左右；
8、樣品和NaN 3 防腐，抑制了酶的反應
樣品不能加 NaN 3 防腐；
9、試劑盒超過有效期
超過效期試劑盒不要使用；
10、試劑開啟時間過長長菌
試劑開啟后請盡量在短時間內用完；
11、移液器吸量不足，移液抽吸排放太快，吸頭內壁掛液太多或內壁不清潔校正移液器
吸頭要配套，每次裝吸頭要吻合緊密。移液不宜過快，排放應完全。吸頭內壁要清潔，一次性使用；
12、elisa試劑盒恒溫箱溫度不足37℃或水浴鍋水溫度不足37℃
放入反應板時注意培養箱溫度，及時調整，孵育反應期間開啟不宜太多，影響溫度平衡。
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