ELISA實驗加樣可能碰到的問題及解決方法
在ELISA實驗中一般有3次加樣步驟，即加標本，加酶結合物，加底物。凍結血清融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上強烈振蕩。在加樣的過程中會碰到什么問題呢?讓我們一起看一下實驗過程中加樣可能碰到的問題:
1、過長(特別是室內溫度較高時);
2、手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間;
3、加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。血清或血漿標本分離不好即進行加樣。
相應解決辦法:
1、標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘; 若在幾天內檢測，可放在2- -8C冰箱中，若要貯存，則置于-20C 的低溫冰箱內。
2、加樣后及時放入孵箱。
3、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4、如果采用AI或其他全自動加樣，選擇F AMN或其他后處理儀器加酶試劑。
5、標本較多時,請分批操作。
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